紫外测试（紫外-可见分光光度法）的测量流程主要分为以下步骤：

一、样品准备

1. ‌溶液配制‌：将待测物质溶解于适当溶剂（如水、乙醇等），确保溶液澄清、无沉淀或气泡，避免干扰吸光度测量‌

2. ‌浓度控制‌：根据待测物质的吸光特性调整浓度，使其在仪器检测范围内（通常吸光度值在0.2-1.0之间）‌。

3. ‌衍生化处理‌：若物质本身不吸收紫外光，需通过化学反应转化为可测衍生物‌。

二、仪器设置与校准

1. ‌仪器预热‌：开启紫外可见分光光度计，预热20-30分钟以保证光源和检测器稳定‌。

2. ‌选择波长‌：根据待测物质的吸收特性设定波长（例如蛋白质常选214nm，药物可能选280nm）‌。

3. ‌基线校准‌

   • ‌零点校准‌：用纯溶剂（空白溶液）装入光学池，调节仪器吸光度为零‌。

   • ‌波长校准‌：使用氘灯或标准滤光片验证波长准确性‌。

   
   

三、吸光度测量

1. ‌装样‌：将样品溶液倒入光学池（比色皿），确保光面清洁无划痕、液面高度一致（通常为池容积的4/5）‌。

2. ‌测量操作‌：

   • 将样品池放入光路，关闭样品室盖‌。

   • 选择“吸光度（A）”模式，启动测量程序，仪器自动显示选定波长下的吸光度值‌。

   
   

3. ‌重复验证‌：同一样品需多次测量以确认结果稳定性‌。

四、数据处理与分析

1. ‌定性分析‌：通过全波长扫描（200-400nm）绘制吸收光谱，比对标准图谱或特征吸收峰（如λmax）判断物质种类‌。

2. ‌定量分析‌：根据朗伯-比尔定律（A=εbc），利用标准曲线法或吸收系数法计算样品浓度‌。

五、注意事项

1. ‌溶液要求‌：避免使用浑浊或高浓度溶液，防止光散射或偏离比尔定律‌。

2. ‌比色皿维护‌：每次使用后需用溶剂清洗，避免残留污染‌。

3. ‌环境控制‌：避免强光、温度波动或电磁干扰，确保测量稳定性‌。

4. ‌仪器维护‌：定期校准光源、单色器和检测器，更新仪器软件参数‌

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