紫外可见分光光度计,简称UV-Vis,是一种基于物质对光的吸收原理进行定性和定量分析的仪器。紫外可见光光度计是测什么的?它通过测量物质在不同波长下的吸收光谱,来揭示物质的化学成分和结构信息。主要用于物质的定性、定量分析和结构表征,以下是其核心要点:
比尔-朗伯定律
吸光度(A)与溶液浓度(c)和光程长度(b)成正比,数学表达式为:A = κcb(κ为摩尔吸收系数)通过测量特定波长下溶液的吸光度,可计算物质浓度
吸收光谱分析
物质对光的吸收具有波长选择性,通过绘制吸光度-波长曲线(吸收光谱),可确定最大吸收波长(λ<sub>max</sub>)和最小吸收波长(λ<sub>min</sub>)
波长范围:190-1100nm(部分型号扩展至近红外区)
波长准确度:±1.0nm
杂散光:≤0.5%(360nm处)
透射比误差:±0.5%
吸光度误差:±0.002(A=0.5时)
化学分析:定量测定溶液浓度(如药物、金属离子)
生物检测:蛋白质、DNA浓度分析及酶活性研究
环境监测:水质污染物(如重金属、有机物)检测
材料表征:固体/液体样品的光吸收特性及颜色分析
反应动力学:监测化学反应进程及中间产物
1852年:比尔提出吸收定律理论
1918年:首台紫外可见分光光度计由美国国家标准局研制
现代发展:自动化、数字化及联用技术(如HPLC-UV)提升分析精度和效率
校准:需定期用标准滤光片或溶液校准波长和吸光度
样品处理:避免气泡和悬浮物干扰,紫外区须使用石英比色皿
维护:保持光学部件清洁,防止光源老化影响稳定性