HPLC高效液相色谱法流动相种类

高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域分析分离技术。它基于液体流动相和固定相之间的相互作用，通过色谱柱将样品分离成单个化合物，然后通过检测器对每个化合物进行检测和记录。HPLC技术的主要类型包括反相、正相、离子交换和尺寸排阻色谱法。

高效液相色谱仪流动相类型有多种，流动相性质对样品的分离影响很大。

一、流动相类型：

1、按组成可分：单组分流动相和多组分流动相。

2、按极性可分：极性流动相、弱极性流动相和非极性流动相。

3、按作用可分：底剂和洗脱剂。

4、按使用方式可分：等度流动相和梯度流动相。

5、按用途可分：己烷、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈和水等。

采用二元或多元组合溶剂作为流动相，可以灵活调节流动相的极性和增加选择性，改进分离和调整出峰时间。

二、流动相性质：

1、底剂决定基本的色谱分离，洗脱剂对某几个组分选择分离。流动相组成改变，极性改变，可显著改变组分分离状况。

2、亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定相的极性，称为正相液液色谱，极性柱称正相柱，正相柱的底剂用低极性溶剂，洗脱剂用极性较强的溶剂。

3、若流动相的极性大于固定液的极性，称为反相液液色谱。非极性柱称为反相柱，反相柱常以水为流动相的主体，再加入不同配比的有机溶剂做调节剂。

RP-HPLC的固定相为非极性溶剂，常用的固定相为十八烷基键合硅胶，流动相为极性溶剂，常用的流动相为甲醇和乙腈。

反相高效液相色谱(RP-HPLC)是由非极性固定相和极性流动相组成的液相色谱系统，与由极性固定相和弱极性流动相组成的液相色谱系统(正相色谱)正好相反。

RP-HPLC的典型固定相是十八烷基键合硅胶，典型流动相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是目前液相色谱中最重要的分离模式，可以用来分离几乎所有能溶于极性或弱极性溶剂的有机物。反相色谱适用于非极性、极性或离子型化合物的分离，大部分分析任务由反相色谱完成。

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