有同学经常做AFM测试,但是对AFM样品要求制备却不是很清楚,今天铄思百检测小编整理了相关信息希望能帮到大家。
AFM原子力显微镜(AFM,Atomic Force Microscopy)是一种纳米级表面形貌和物理性质测量技术,能够直接观测纳米级别的表面形态、粗糙度、力学性质等。AFM基于量子力学原理,通过检测原子间的作用力来实现对样品表面的高分辨率成像。

为了保证 AFM 测试的准确性和有效性,在进行 AFM 测试前,需要对样品进行制备。
以下是一些常见的样品制备要求:
1.样品表面应干净、平整和均匀。任何污染物或不均匀的表面都会影响 AFM 测试的精确性和准确性。
2.样品必须保持在干燥的环境中。如果样品表面有水分或其他液体残留物,则可能会导致测试结果不准确。
3.对于有机物样品,应具有足够的疏水性,以保证平整的表面并防止吸附液污染样品。
4.样品大小一般不超过 1 厘米,高度也应控制在 1 厘米以内。
5.对于某些特殊样品,如纳米线、纳米管等,需要进行特殊处理以保证成像质量。
接下来再具体看一下:
有衬底的样品
样品台最大尺寸200 mm(这里以Bruker仪器为例),样品表面最大起伏一般要求1微米以下。
块体样品:块体直径大于10 mm时,清洁样品表面(氮气吹扫或酒精丙酮等试剂清洗)后放置在样品台打开真空吸附固定样品,块体直径小于10 mm时,需要将样品粘贴到铁片上后进行测试(图1) ;
薄膜样品:清洁表面,尺寸要求和上述块体一样,固定在样品台上测试;

图1有衬底样品的制备(a)样品制备到硅片上(b)样品制备到金属片上
无衬底样品
生物样品:将溶液分散后滴到干净硅片或云母上,静置10分钟,用氮气吹干后测试;某些生物大分子,需要特定的吸附固定方式,比如DNA分子,为了增强带负电荷的DNA和同样带负电荷的云母基底间的相互作用力,在DNA样品中加入一些二价阳离子如Mg2+,
Zn2+等。
细胞等活性生物样品:
(1)大气环境下扫描
1)细胞固定可以采用自然干燥法,但是经过此法处理的细胞与活细胞状态相差甚大。
2)溶液固定法
1:将培养好的细胞用2.5 %戊二醛固定10分钟,之后用氮气吹干。
②:琼脂糖凝胶固定法,对细胞几乎没有损伤,可以更好的维持细胞的原始状态。
3)为防止其他因素(如培养液里面的盐等成分结晶或聚集)的干扰,要注意对样品进行清洗,根据经验进行。
(2)液体环境下扫描
液相环境下,由于细胞与基底接触不是很牢固,细胞有时会跟着探针滑动,成像稳定性稍差,可以用琼脂凝胶固定法或对基底表面进行聚赖氨酸(表面带正电)修饰,利用聚赖氨酸与细胞(表面带负电)间的静电相互作用来固定细胞。粉末:将粉末放入酒精或丙酮中超声一段时间后分散均匀,将溶液滴到云母或硅片、玻璃片上,加热烘干后用氮气吹扫表面后进行测试;
薄膜(有机或无机薄膜)︰将薄膜裁剪合适大小后,用专用双面胶带粘贴到基底上(一定固定牢固,薄膜贴平,无气泡、倾斜或大的起伏等),氮气吹扫后进行测试。
测试需要导通的样品
有衬底样品:衬底表面需镀金、铂等导电薄膜,将衬底用导电银浆固定在样品台上,保证衬底上表面和样品台导通(图2) ;
无衬底粉末:将粉末放置在溶液中超声分散,滴到导电衬底上后烘干,放置在样品台上进行测试。

图2测试需要导通样品的制备(a)导电银浆粘贴样品(b)铜胶带连接用品表面和样品台
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